產(chǎn)品特點(diǎn)：

用于特異性檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中支原體的污染

用于擴(kuò)增支原體基因組中16S rRNA編碼區(qū)

特殊的引物設(shè)計(jì)擴(kuò)增用于覆蓋支原體的三大類（Mycoplasma,Acholeplasma and Ureaplasma）,因此可檢測(cè)超過95%的潛在的細(xì)胞污染。

檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，3小時(shí)內(nèi)出結(jié)果。

檢測(cè)靈敏度高：可檢測(cè)到100ul細(xì)胞上清液中2-5毫微微克的支原體DNA。

特異性高，只擴(kuò)增細(xì)胞培養(yǎng)液中支原體DNA，而真核細(xì)胞和細(xì)菌的DNA被擴(kuò)增。

試劑盒帶有陽(yáng)性對(duì)照用于驗(yàn)證PCR體系的穩(wěn)定性。

試劑盒內(nèi)帶有內(nèi)參對(duì)照，用于排除PCR抑制劑引起的假陰性。

 
試劑盒用于擴(kuò)增的支原體種屬及對(duì)應(yīng)PCR產(chǎn)物對(duì)照片段

支原體種屬    PCR產(chǎn)物片段(bp)    

A.laidlawii    611    

M.arginini    448    

M.arthritidis    486    

M.bovis    605    

M.cloacale    459    

M.falconis    458    

M.faucium    479    

M.fermentans    579    

M.genitalium    464    

M.hominis    448    

M.hyorhinis    525    

M.hyosynoviae    471    

M.opalescents    573    

M.orale    503    

M.pirum    533    

M.pneumonia    493    

M.salivarium    482    

M.synoviae    572    

U.urealyticum    558    

 
 
 
結(jié)果分析：

細(xì)胞如被支原體污染，可擴(kuò)增到448-611bp一條或多個(gè)條帶

樣本中包含內(nèi)參的DNA將會(huì)擴(kuò)增出270bp的PCR片段（見圖，泳道7），該擴(kuò)增表明實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)可靠性。

如在一些樣品中擴(kuò)增不到內(nèi)參(270bp)，這種情況下可設(shè)置陰性對(duì)照（樣本為水），可擴(kuò)增到270bp的條帶。

如果樣品中含有PCR的抑制劑，可通過DNA提取去除。

如果細(xì)胞發(fā)生嚴(yán)重的支原體污染，448-611bp擴(kuò)增產(chǎn)物將聚集或270bp的內(nèi)參將消除（見圖，泳道6）

低于100bp的低濃度片段，表明是二聚體或非特異性片段，而非陽(yáng)性結(jié)果，這種情況不影響檢測(cè)結(jié)果的精度。